Перевозки пассажиров в районе обеспечивает филиал «Автобусный парк № 4 г. Волковыск» ОАО «Гроднооблавтотранс». Общественный транспорт обслуживает 10 городских, 45 пригородных и 10 междугородних маршрутов. В Волковысском районе пассажирским транспортом охвачены 188 населенных пунктов. С целью улучшения качества обслуживания пассажиров производится постоянное обновление подвижного состава (в 2010 г. приобретено 4 новых автобуса, в январе – сентябре 2011 г. – 15 автобусов). В 2010 г. внедрены компьютерная система продажи билетов, автоматизированная система диспетчерского управления движением транспорта на основе спутниковых технологий. В здании автовокзала в 2010 г. начало деятельность туристическое бюро филиала «Автобусный парк №4 г. Волковыск» ОАО «Гроднооблавтотранс», которое занимается организацией туристических поездок по Республике Беларусь и странам ближнего зарубежья.

Перевозки грузов осуществляют 4 автотранспортные организации:
ОАО «Красносельскавтотранс»,
ОАО «Волковыскспецавтотранс»,
филиал «Грузовой автомобильный парк №6 г. Волковыск» ОАО «Гроднооблавтотранс»,
филиал ЧУП «Автотранс №9» Гродненского облпотребсоюза, в которых в общей сложности работают более 500 человек.

В Волковыске находится крупный железнодорожный узел, который объединяет локомотивное и вагонное депо, станции «Волковыск» и «Россь», а также дистанцию пути. В этих организациях работает более 1,6 тысячи человек.